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最新檢測員技術(shù)工作總結(jié)優(yōu)質(zhì)(十篇)

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最新檢測員技術(shù)工作總結(jié)優(yōu)質(zhì)(十篇)
時間:2023-06-11 18:04:26     小編:zdfb

總結(jié)是在一段時間內(nèi)對學(xué)習(xí)和工作生活等表現(xiàn)加以總結(jié)和概括的一種書面材料,它可以促使我們思考,我想我們需要寫一份總結(jié)了吧。什么樣的總結(jié)才是有效的呢?以下我給大家整理了一些優(yōu)質(zhì)的總結(jié)范文,希望對大家能夠有所幫助。

檢測員技術(shù)工作總結(jié)篇一

pcr產(chǎn)物的電泳檢測時間一般為48h以內(nèi),有些最好于當日電泳檢測,大于48h 后帶型不規(guī)則甚致消失。

一.假陰性,不出現(xiàn)擴增條帶

pcr反應(yīng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)有①模板核酸的制備,②引物的質(zhì)量與特異性,③酶的質(zhì)量及活性 ④pcr循環(huán)條件。尋找原因亦應(yīng)針對上述環(huán)節(jié)進行分析研究。

模板:①模板中含有雜蛋白質(zhì),②模板中含有taq酶抑制劑,③模板中蛋白質(zhì)沒有消化除凈,特別是染色體中的組蛋白,④在提取制備模板時丟失過多,或吸入酚。⑤模板核酸變性不徹底。在酶和引物質(zhì)量好時,不出現(xiàn)擴增帶,極有可能是標本的消化處理,模板核酸提取過程出了毛病,因而要配制有效而穩(wěn)定的消化處理液,其程序亦應(yīng)固定不宜隨意更改。

酶失活:需更換新酶,或新舊兩種酶同時使用,以分析是否因酶的活性喪失或不夠而導(dǎo)致假陰性。需注意的是有時忘加taq酶或溴乙錠。

引物:引物質(zhì)量、引物的濃度、兩條引物的濃度是否對稱,是pcr失敗或擴增條帶不理想、容易彌散的常見原因。有些批號的引物合成質(zhì)量有問題,兩條引物一條濃度高,一條濃度低,造成低效率的不對稱擴增,對策為:①選定一個好的引物合成單位。②引物的濃度不僅要看od值,更要注重引物原液做瓊脂糖凝膠電泳,一定要有引物條帶出現(xiàn),而且兩引物帶的亮度應(yīng)大體一致,如一條引物有條帶,一條引物無條帶,此時做pcr有可能失敗,應(yīng)和引物合成單位協(xié)商解決。如一條引物亮度高,一條亮度低,在稀釋引物時要平衡其濃度。③引物應(yīng)高濃度小量分裝保存,防止多次凍融或長期放冰箱冷藏部分,導(dǎo)致引物變質(zhì)降解失效。④引物設(shè)計不合理,如引物長度不夠,引物之間形成二聚體等。

mg2+濃度:mg2+離子濃度對pcr擴增效率影響很大,濃度過高可降低pcr擴增的特異性,濃度過低則影響pcr擴增產(chǎn)量甚至使pcr擴增失敗而不出擴增條帶。

反應(yīng)體積的改變:通常進行pcr擴增采用的體積為20ul、30ul、50ul?;?00ul,應(yīng)用多大體積進行pcr擴增,是根據(jù)科研和臨床檢測不同目的而設(shè)定,在做小體積如20ul后,再做大體積時,一定要模索條件,否則容易失敗。

物理原因:變性對pcr擴增來說相當重要,如變性溫度低,變性時間短,極有可能出現(xiàn)假陰性;退火溫度過低,可致非特異性擴增而降低特異性擴增效率退火溫度過高影響引物與模板的結(jié)合而降低pcr擴增效率。有時還有必要用標準的溫度計,檢測一下擴增儀或水溶鍋內(nèi)的變性、退火和延伸溫度,這也是pcr失敗的原因之一。

靶序列變異:如靶序列發(fā)生突變或缺失,影響引物與模板特異性結(jié)合,或因靶序列某段缺失使引物與模板失去互補序列,其pcr擴增是不會成功的。

二.假陽性,出現(xiàn)非特異性擴增帶 1.假陽性

出現(xiàn)的pcr擴增條帶與目的靶序列條帶一致,有時其條帶更整齊,亮度更高。引物設(shè)計不合適:選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性,因而在進行pcr 擴增時,擴增出的pcr產(chǎn)物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出現(xiàn)假陽性。需重新設(shè)計引物。

段核酸污染,這些小片段比靶序列短,但有一定的同源性??苫ハ嗥唇?與引物互補后,可擴增出pcr產(chǎn)物,而導(dǎo)致假陽性的產(chǎn)生,可用巢式pcr方法來減輕或消除。

2.出現(xiàn)非特異性擴增帶

pcr擴增后出現(xiàn)的條帶與預(yù)計的大小不一致,或大或小,或者同時出現(xiàn)特異性擴增帶與非特異性擴增帶。非特異性條帶的出現(xiàn),其原因:一是引物與靶序列不完全互補、或引物聚合形成二聚體。二是mg2+離子濃度過高、退火溫度過低,及pcr 循環(huán)次數(shù)過多有關(guān)。其次是酶的質(zhì)和量,往往一些來源的酶易出現(xiàn)非特異條帶而另一來源的酶則不出現(xiàn),酶量過多有時也會出現(xiàn)非特異性擴增。其對策有:①必要時重新設(shè)計引物。②減低酶量或調(diào)換另一來源的酶。③降低引物量,適當增加模板量,減少循環(huán)次數(shù)。④適當提高退火溫度或采用二溫度點法(93℃變性,65℃左右退火與延伸。

3.出現(xiàn)片狀拖帶或涂抹帶

pcr擴增有時出現(xiàn)涂抹帶或片狀帶或地毯樣帶。其原因往往由于酶量過多或酶的質(zhì)量差,dntp濃度過高,mg2+濃度過高,退火溫度過低,循環(huán)次數(shù)過多引起。其對策有:①減少酶量,或調(diào)換另一來源的酶。②減少dntp的濃度。③適當降低mg2+濃度。④增加模板量,減少循環(huán)次數(shù)。

污染與對策

(一標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染,或標本放置時,由于密封不嚴溢于容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中,由于吸樣槍污染導(dǎo)致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散,導(dǎo)致彼此間的污染。

(二pcr試劑的污染:主要是由于在pcr試劑配制過程中,由于加樣槍、容器、雙蒸水及其它溶液被pcr核酸模板污染.(三pcr擴增產(chǎn)物污染:這是pcr反應(yīng)中最主要最常見的污染問題,因為pcr產(chǎn)物拷貝量 大(一般為1013拷貝/ml,遠遠高于pcr檢測數(shù)個拷貝的極限,所以極微量的pcr產(chǎn)物 污染,就可造成假陽就可形成假陽性。

一個好的實驗室,要時刻注意污染的監(jiān)測,考慮有無污染是什么原因造成的污染,以便采取措施,防止和消除污染。

四.對照試驗

1.陽性對照:在建立pcr反應(yīng)實驗室及一般的檢驗單位都應(yīng)設(shè)有pcr陽性對照,它是pcr反應(yīng)是否成功、產(chǎn)物條帶位置及大小是否合乎理論要求的一個重要的參考標志。陽性對照要選擇擴增度中等、重復(fù)性好,經(jīng)各種鑒定是該產(chǎn)物的標本,如以重組質(zhì)粒為陽性對照,其含量宜低不宜高(100個拷貝以下,但陽性對照尤其是重組質(zhì)粒及高濃度陽性標本,其對檢測或擴增樣品污染的可能性很大。因而當某一pcr試劑經(jīng)自己使用穩(wěn)定,檢驗人員心中有數(shù)時,在以后的實驗中可免設(shè)陽性對照。

2.陰性對照:每次pcr實驗務(wù)必做陰性對照。它包括①標本對照:被檢的標本是血清就用鑒定后的正常血清作對照;被檢的標本是組織細胞就用相應(yīng)的組織細胞作對照。②試劑對照:在pcr試劑中不加模板dna或rna,進行pcr擴增,以監(jiān)測試劑是否污染。

3.重復(fù)性試驗

4.選擇不同區(qū)域的引物進行pcr擴增 五.防止污染的方法

(一合理分隔實驗室:將樣品的處理、配制pcr反應(yīng)液、pcr循環(huán)擴增及pcr產(chǎn)物的鑒定等步驟分區(qū)或分室進行,特別注意樣本處理及pcr產(chǎn)物的鑒定應(yīng)與其它步驟嚴格分開。最好能劃分①標本處理區(qū);②pcr反應(yīng)液制備區(qū);③pcr循環(huán)擴增區(qū);④pcr產(chǎn)物鑒定區(qū)。其實驗用品及吸樣槍應(yīng)專用,實驗前應(yīng)將實驗室用紫外線消毒以破壞殘留的dna或rna。

核酸時要十分小心,吸樣要慢,吸樣時盡量一次性完成,忌多次抽吸,以免 交叉污染或產(chǎn)生氣溶膠污染。(三預(yù)混和分裝 pcr 試劑:所有的 pcr 試劑都應(yīng)小量分裝,如有可能,pcr 反應(yīng)液應(yīng)預(yù)先配制好,然后小量分裝,-20℃保存。以減少重復(fù)加樣次數(shù),避免污染機會。另外,pcr 試劑,pcr 反應(yīng)液應(yīng)與樣品及 pcr 產(chǎn)物分開保存,不應(yīng)放于同一冰盒或同一冰箱。(四防止操作人員污染,使用一次性手套、吸頭、小離心管應(yīng)一次性使 用。(五設(shè)立適當?shù)年栃詫φ蘸完幮詫φ眨栃詫φ找阅艹霈F(xiàn)擴增條帶的最 低量的標準病原體核酸為宜,并注意交叉污染的可能性,每次反應(yīng)都應(yīng)有一 管不加模板的試劑對照及相應(yīng)不含有被擴增核酸的樣品作陰性對照。(六減少 pcr 循環(huán)次數(shù),只要 pcr 產(chǎn)物達到檢測水平就適可而止。(七選擇質(zhì)量好的 eppendorf 管,以避免樣本外溢及外來核酸的進入,打開離心管前應(yīng)先離心,將管壁及管蓋上的液體甩至管底部。開管動作要輕,以防管內(nèi)液體濺出。呵呵 其實 dna(或 rna)的提取方法及 dna 的質(zhì)量也很關(guān)鍵 例如:sds 法和 ctab 法提取的 dna 與 rna 的 pcr 結(jié)果有很大的差異的。呵呵。

檢測員技術(shù)工作總結(jié)篇二

工作一年后轉(zhuǎn)入現(xiàn)場施工管理。擔(dān)任土建技術(shù)員。但依舊于嚴謹?shù)墓ぷ鲬B(tài)度對待現(xiàn)常由于以前的檢測工作與現(xiàn)場管理工作差別比較大,這對我來說既可以說是機遇,也可以說是挑戰(zhàn)。機遇就是進入小單位職位分工沒有那么明確,總攬現(xiàn)場所有工作;挑戰(zhàn)就是在經(jīng)驗實踐缺乏的情況下?lián)维F(xiàn)場技術(shù)總負責(zé)。以前僅靠自己的技術(shù),而現(xiàn)在則也要抓好人員安排、施工進度計劃等一大堆管理工作。一時工作壓力極大。我時刻嚴格要求自己,遇到問題不斷地請教有經(jīng)驗的同事、老師。各種方案作對比尋求最佳方法。自己摸索實踐,在較短的時間內(nèi)便熟悉了工作,完成了角色轉(zhuǎn)換過程,明確了工作的程序、方向,提高了工作技能及管理能力,在具體的工作中形成了一個清晰的工作思路,能夠順利的開展工作并熟練圓滿地完成本職工作。

1.專業(yè)知識、工作能力和具體工作

從拿到圖紙到圖紙會審,認真的查看每一個部位細節(jié),核對數(shù)據(jù),思考施工步驟方案。做到腦中有圖。組織圖紙會審。協(xié)調(diào)交換與業(yè)主、設(shè)計、監(jiān)理各方意見。進入工程開工,認真了解每一個部位施工細節(jié),按設(shè)計圖紙要求,嚴格編制本專業(yè)施工方案,對關(guān)鍵點編制作業(yè)指導(dǎo)書,監(jiān)理單位確認后執(zhí)行。同時在施工準備過程中對班組進行技術(shù)、安全交底,班組對所施工內(nèi)容做到心中有數(shù),按施工規(guī)范嚴格要求。施工過程中,做好班組自檢、復(fù)檢、專職檢“三檢”工作,同時做好分部分項質(zhì)量檢驗評定記錄、隱蔽記錄及相關(guān)質(zhì)保資料。嚴格控制原材料、半成品、成品材料應(yīng)用于工程。

由于自己的經(jīng)驗不足致使自己勢必付出的勞動強度要比別人大,好在自己在學(xué)時的專業(yè)知識比較扎實。工作也嚴謹認真。使我記憶最深的'就是測量時查出有條斜軸樁位偏離軸心三十公分,由于當時沒有樁竣工圖致使自己復(fù)核三遍多最后才確定打樁錯誤。打樁隊也承認施工時失誤;還有如某些承臺加深時業(yè)主、監(jiān)理要求鋼筋籠相應(yīng)增加,而那時鋼筋已下好料。依據(jù)自己所學(xué)砼具有較強抗壓性能這點再根據(jù)查閱資料和問有經(jīng)驗老師傅指點。堅信不增加鋼筋的情況下依舊能滿足工程需要。以致與設(shè)計方交流說服業(yè)主、監(jiān)理做到省了不少鋼筋,運用自己的所學(xué)理論知識結(jié)合實際情況,做到滿足工程質(zhì)量的前提下盡量降低建筑成本;還有首層梁板分開澆筑,可能對于老施工來說那是再簡單不過的事,但說實話對于新手來說那是比較大的飛躍,至少能做到往滿足工程質(zhì)量的情況下為施工省材。雖說不是原創(chuàng),但主要的是作為一名稱職的技術(shù)員能取別人之長補自己之短。

檢測員技術(shù)工作總結(jié)篇三

當今社會,食品中存在的污染情況越來越嚴重。豬肉注水、奶粉摻假、蔬菜有機農(nóng)藥含量超標等等,嚴重影響著人們的身體健康。pcr改進技術(shù)可以簡化檢測步驟、提高檢測精準度,具有操作簡便、檢測速度快、檢測精度高等優(yōu)點,在食品安全檢測工作中的使用率高、使用范圍廣泛。

食品安全檢測的主要內(nèi)容

食品安全檢測的內(nèi)容比較復(fù)雜,涉及面廣泛,主要的檢測內(nèi)容是:食品污染成分、食品營養(yǎng)成分、食品是否具有添加劑以及食品質(zhì)量的總體檢測等等。食品安全檢測的指標主要包括:成分分析、農(nóng)藥殘留分析、食品添加劑分析、微量元素分析和有害物質(zhì)分析等。常用的食品安全就按冊方法有兩種:一種是傳統(tǒng)的常規(guī)分析法,一種是儀器分析法。儀器分析法是食品安全檢測中的最常用的方法。

食品安全檢測人員對食品檢測的檢驗要求有三部分內(nèi)容:①要嚴格按照標準中規(guī)定的分析步驟依次進行,在實驗室中,要對所有的不安全因素采取防護措施,其中,不安全因素都包括:爆炸、腐蝕、燒傷等等;②在實驗室中,檢測人員需要準確、詳細地記錄檢測的方法和數(shù)據(jù)等信息;③在食品安全檢測完成后,檢測人員需要檢測數(shù)據(jù)的統(tǒng)計和整理工作。

pcr及其改進技術(shù)概括

pcr的是指聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)或者多聚酶鏈反應(yīng)技術(shù),常用于放大特定的dna,主要優(yōu)點有簡潔、方便、敏感、重復(fù)性好和自動化等.傳統(tǒng)的pcr技術(shù)在很多方面存在著不足,經(jīng)過改進后有了很多較為明顯的優(yōu)點,但是,實時定量pcr技術(shù)和多重pcr技術(shù)在某些方面仍然有問題。使用實時定量pcr技術(shù)時首先需要有專門的儀器,技術(shù)成本高,存在的檢測結(jié)果偏差大。多重pcr技術(shù)具有非特性結(jié)合問題,在使用多重pcr技術(shù)時如果不注意觀察樣本和樣本之間的反應(yīng)和作用,會發(fā)生假陽性或者假陰性的問題。

傳統(tǒng)的pcr技術(shù)在食品檢測中的具體應(yīng)用

檢測食品中所含成分。比如,人們在買肉的時候會考慮到肉里面有沒有摻假、是否注過水、屠宰前的家畜有沒有患有疾病等等。為了保證消費者的合法權(quán)益和身體健康,食品安全檢測人員可以使用pcr技術(shù)方便、快捷的將食品中存在的不合格現(xiàn)象檢測出來,降低食品安全隱患。

用于檢測食品中的病菌。在1992年,有些相關(guān)報道中提出了pcr檢測技術(shù),經(jīng)過多年的研究和實踐,將pcr技術(shù)應(yīng)用到食品安全檢測中得到了很大的回響。用pcr技術(shù)檢測食品中攜帶的病菌,例如,豬羊牛肉中的大腸桿菌。

檢測食品中包含的營養(yǎng)成分。隨著人們生活水平的逐漸提升,人們越來越注重養(yǎng)生。食物中含有的營養(yǎng)成分和主要物質(zhì)都是人們關(guān)心的重點。在走親訪友的時候,一般會送老人和孩子營養(yǎng)價值比較高的禮品。有很多經(jīng)過加工的食品,人們對肉眼看不出食品質(zhì)量的好壞,那么如何判斷食品中含有的營養(yǎng)成分,就需要食品檢測人員使用pcr技術(shù)進行檢測。

pcr改進技術(shù)在食品檢測中的具體應(yīng)用

pcr-dgge在食品檢測中的應(yīng)用。dgge技術(shù)又稱變性梯度凝膠電泳技術(shù)。pcr-dgge技術(shù)是一種聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)和變性梯度凝膠電泳技術(shù)結(jié)合在一起的新技術(shù),具有敏感性高、特異性強的優(yōu)點。使用pcr-dgge技術(shù)進行食品檢測技術(shù),可以將食品中dna提取出來,利用食品的基因和食品的核酸對食品進一步的監(jiān)測。比如:利用pcr-dgge技術(shù)對奶酪進行檢測,可以檢測出奶酪中存在乳桿菌、乳酸菌和乳球菌包括污染物等等。

實時定量pcr技術(shù)在食品檢測中的應(yīng)用。實時定量pcr技術(shù)是在pcr技術(shù)的基礎(chǔ)上,結(jié)合熒光信號來進行實時檢測。實時定量pcr技術(shù)主要采用的是完全閉管檢測,實時定量pcr技術(shù)是pcr改進技術(shù)中操作最方便、結(jié)果最準確、用時最短的一種。在各種食品安全檢測中得到了廣泛使用。

多重pcr技術(shù)在食品檢測中的具體應(yīng)用。多重pcr技術(shù)是在傳統(tǒng)、單一的pcr技術(shù)基礎(chǔ)上改進后的技術(shù)。多重pcr技術(shù)一次可以?z測出多種病菌,像是大腸埃希菌、沙門菌屬、霍亂弧菌等菌類均可一次檢測出來。多重pcr技術(shù)操作簡單、快速、結(jié)果精準,多用于對番茄、大豆、玉米等轉(zhuǎn)基因食品的檢測中。

隨著毒豆芽、瘦肉精、地溝油等各種食品污染問題的產(chǎn)生,人們對食品的質(zhì)量產(chǎn)生了很大的懷疑。一些黑心商家只注重經(jīng)濟效益,違規(guī)經(jīng)營,生產(chǎn)食品質(zhì)量不合格。通過對食品進行安全檢驗,分析食品中所含的成分和營養(yǎng)比例,促進食品事物的健康、安全發(fā)展,提高人們的飲食安全。在食品安全檢測工作中使用pcr技術(shù)可以很大程度上解決食品安全中存在的問題。

作者簡介:

陳冬梅,碩士,伊犁州食品藥品檢驗所,高級工程師,食品負責(zé)人

檢測員技術(shù)工作總結(jié)篇四

(1)用產(chǎn)生熒光信號的指示劑顯示擴增產(chǎn)物的量,進行實時動態(tài)連續(xù)的熒光監(jiān)測,避免終點定量的不準確性,并且消除了標本和產(chǎn)物的污染,且無復(fù)雜的產(chǎn)物后續(xù)處理過程。

在pcr反應(yīng)體系中加入熒光染料或熒光基團,這些熒光物質(zhì)有其特定的波長。儀器可以自動檢出,利用熒光信號積累,實時監(jiān)測整個pcr進程,在pcr循環(huán)中,測量的信號將作為熒光閾值的坐標。并且引入一個——ct值(threshold cycle)概念,ct值是指產(chǎn)生可被檢測到得熒光信號所需的最小循環(huán)數(shù),是在pcr循環(huán)過程中熒光信號由本底開始進入指數(shù)增長階段的拐點所對應(yīng)的循環(huán)次數(shù)。熒光閾值相當于基線熒光信號的平均信號標準偏差的10倍。一般認為在熒光閾值以上所測出的熒光信號是一個可信的信號,可以用于定義一個樣本的ct值。通常用不同濃度的標準樣品的ct值來產(chǎn)生標準曲線,然后計算相對方程式。

① 基因表達研究:對β地中海貧血癥患者β與γ珠蛋白mrna水平進行檢測,其結(jié)果特異性強、定量準確,為了解β地中海貧血的分子病理機制及其臨床診斷提供了可靠的檢測數(shù)據(jù)。

① 病原體檢測:由于實時熒光定量pcr方法可靠性和重復(fù)性好,并且操作簡便、快速、結(jié)果判斷客觀,目前,人們用此方法對人類免疫缺陷病毒、肝炎病毒、結(jié)核桿菌、巨細胞病毒、eb病毒、流感病毒a、流感病毒b等病原體的檢測。熒光定量pcr問世后的幾年中,積累了大量有關(guān)病原體核酸量與感染性疾病發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后之間關(guān)系的資料,這些研究資料不斷豐富,將形成感染性疾病的臨床分子診斷標準。

② 藥物療效考核:利用實時熒光定量pcr技術(shù)檢測臨床樣品中與抗藥性相關(guān)的基因的表達。結(jié)果證明,實時熒光定量pcr系統(tǒng)是定量檢測抗藥基因表達的可靠方法,應(yīng)用這種技術(shù)可以預(yù)測化療將引起的反應(yīng)。

③ 腫瘤基因檢測:腫瘤的本質(zhì)是細胞內(nèi)基因發(fā)生了變化,是一種多基因異常的疾病,這些異常變化用實時熒光定量pcr方法都可以檢測出來。

用實時熒光定量pcr方法對免疫組分進行分析是其應(yīng)用的重要方面。

pcr產(chǎn)物熔解曲線圖(單一峰圖表明pcr擴增產(chǎn)物的單一性)探針法:

優(yōu)惠包干價:120元/樣/基因(sybrgreeni法,相對定量)

(如圖1所示)。

1.熒光閾值(threshold)的設(shè)定

每個模板的ct值與該模板的起始拷貝數(shù)的對數(shù)存在線性關(guān)系,公式如下。ct=-1/lg(1+ex)*lgx0+lgn/lg(1+ex)n為擴增反應(yīng)的循環(huán)次數(shù),x0為初始模板量,ex為擴增效率,n為熒光擴增信號達到閾值強度時擴增產(chǎn)物的量。

起始拷貝數(shù)越多,ct值越小。利用已知起始拷貝數(shù)的標準品可作出標準曲線,其中橫坐標代表起始拷貝數(shù)的對數(shù),縱坐標代ct值。因此,只要獲得未知樣品的ct值,即可從標準曲線上計算出該樣品的起始拷貝數(shù)。實時熒光定量pcr所使用的熒光物質(zhì)可分為兩種:熒光探針和熒光染料?,F(xiàn)將其原理簡述如下: 熒光探針:pcr擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;pcr擴增時,taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條dna鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與pcr產(chǎn)物形成完全同步。而新型taqman-mgb探針使該技術(shù)既可進行基因定量分析,又可分析基因突變(snp),有望成為基因診斷和個體化用藥分析的首選技術(shù)平臺。

1)內(nèi)參照法:在不同的pcr反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標和引物,內(nèi)標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內(nèi)標也被擴增。在pcr產(chǎn)物中,由于內(nèi)標與靶模板的長度不同,二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內(nèi)標為對照定量待檢測模板。2)競爭法:選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內(nèi)切酶消化pcr產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。

若在待測樣品中加入已知起始拷貝數(shù)的內(nèi)標,則pcr反應(yīng)變?yōu)殡p重pcr,雙重pcr反應(yīng)中存在兩種模板之間的干擾和競爭,尤其當兩種模板的起始拷貝數(shù)相差比較大時,這種競爭會表現(xiàn)得更為顯著。但由于待測樣品的起始拷貝數(shù)是未知的,所以無法加入合適數(shù)量的已知模板作為內(nèi)標。也正是這個原因,傳統(tǒng)定量方法雖然加入內(nèi)標,但仍然只是一種半定量的方法。實時熒光定量pcr技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品ct值的計算,根據(jù)標準曲線獲得定量結(jié)果。因此,實時熒光定量pcr無需內(nèi)標是建立在兩個基礎(chǔ)之上的: 1)ct值的重現(xiàn)性pcr循環(huán)在到達ct值所在的循環(huán)數(shù)時,剛剛進入真正的指數(shù)擴增期(對數(shù)期),此時微小誤差尚未放大,因此ct值的重現(xiàn)性極好,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增,得到的ct值是恒定的。

2)ct值與起始模板的線性關(guān)系由于ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量pcr是一種采用外標準曲線定量的方法。

外標準曲線的定量方法相比內(nèi)標法是一種準確的、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標準曲線的實時熒光定量pcr是迄今為止定量最準確,重現(xiàn)性最好的定量方法,已得到全世界的公認,廣泛用于基因表達研究、轉(zhuǎn)基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。各級各類醫(yī)療機構(gòu)、大學(xué)及研究所、cdc、檢驗檢疫局、獸醫(yī)站、食品企業(yè)及乳品廠等。

由于qpcr是實時定量檢測致病病原體基因核酸,因此它比化學(xué)發(fā)光、時間分辨、蛋白芯片等免疫學(xué)方法更具獨到優(yōu)勢。

檢測員技術(shù)工作總結(jié)篇五

[臨床應(yīng)用] 檢驗科基因診斷室近日引進了德國羅氏的全自動熒光定量分析儀(lighter cycler),并在近期內(nèi)申請國家標準的pcr室。由于pcr技術(shù)具有高靈敏度、高特異性、快速簡便及直接檢測致病病原體或異?;虻忍攸c,成為基因診斷在臨床應(yīng)用最為廣泛的技術(shù)之一。

在90年代,pcr技術(shù)在我國臨床診斷曾得到廣泛應(yīng)用,但由于pcr產(chǎn)品生產(chǎn)產(chǎn)家的良莠不齊,pcr技術(shù)本身的特點對于實驗條件提出特殊的要求,造成各種假陰性或假陽性結(jié)果,反而給臨床診斷帶來困難和錯誤。目前熒光pcr的興起以及標準試驗室的認證為pcr的應(yīng)用顯示出更為光明的前景。

一、早期診斷:免疫學(xué)診斷主要是抗原抗體反應(yīng),應(yīng)用于臨床通常在體內(nèi)產(chǎn)生抗體以后,許多病原體的抗體產(chǎn)生存在較長的“窗口期”,不利于對疾病的早期診斷;而pcr方法直接檢測病原體的dna/rna,能大大縮短“窗口期”。以hcv為例,免疫學(xué)檢測的“窗口期”平均長達70天,而熒光pcr可將“窗口期”縮短59天,顯然有利于疾病的早期診斷。

二、藥物療效觀察:對原體的藥物治療中,免疫學(xué)指標的變化通常比較滯后出現(xiàn),且受個體差異影響較大,從而對臨床判斷難以及時提供直接證據(jù);而熒光定量pcr檢測可直接反映病原體滴度是否受藥物治療發(fā)生變化,從而為藥物療效觀察提供直接依據(jù),以供治療方案參考;同時藥物治療中可能引起的基因變異等情況更依賴核酸檢測提供直接證據(jù)。

三、病情判斷和預(yù)后評價:評估受侵器官或組織的炎癥發(fā)生程度以及是否發(fā)生病變;長時間機體病毒高水平的患者尤其是慢性病患者往往預(yù)后不好。因此對病原體的定量pcr檢測對病情和預(yù)后評估均有參考意義。

四、加快疾病的診斷:許多病原體到目前為止仍舊依靠傳統(tǒng)的細菌培養(yǎng)作為診斷手段,操作繁瑣費時。以結(jié)核桿菌為例,傳統(tǒng)培養(yǎng)法需要1-2個月,而熒光pcr可將檢測時間縮短至半天,能更及時地為臨床提供診斷依據(jù)。

五、疾病的發(fā)病監(jiān)控:許多病原體可以感染人體后整合入細胞內(nèi)成為整合型,而一旦機體免疫力下降等又重新進入活動期并引致發(fā)病,臨床上希望通過檢測病原體基因的數(shù)量變化并結(jié)合臨床表現(xiàn)找出其活動以及是否引起發(fā)病的規(guī)律,熒光定量pcr可以為此提供直接證據(jù)。

六、遺傳疾病的診斷:熒光pcr可實現(xiàn)對點突變、缺失突變、插入突變、多基因突變等的檢測。對產(chǎn)前診斷具有其他方法不可比擬的優(yōu)勢,有利于優(yōu)生優(yōu)育,提高人口素質(zhì)。

七、獻血員的篩選:pcr的高靈敏度及其對窗口期的縮短使其在提高輸血安全方面有重要作為,目前美國、日本以及歐洲均已采用pcr對獻血員進行篩選。

八、腫瘤的診斷:熒光pcr可對原癌基因的突變和易位等作出檢測;對原癌基因的mrna進行定量分析;有利于腫瘤的早期診斷,甚至癌前診斷;探索癌變發(fā)生機理的研究提供參考;區(qū)別腫瘤的良性和惡性以及炎癥反應(yīng)。

目前,檢驗科已開展乙肝、丙肝病毒核酸的定量檢測,以及結(jié)核桿菌、淋球菌、衣原體的檢測,隨著檢驗技術(shù)的不斷提高,陸續(xù)將開展其它項目,也希望臨床廣為利用。

檢測員技術(shù)工作總結(jié)篇六

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摘 要:電線電纜是電能的主要載體,對整個電網(wǎng)系統(tǒng)的發(fā)展至關(guān)重要。隨著電線電纜產(chǎn)品在各個領(lǐng)域的普及,社會各界對電網(wǎng)運行的要求越來越高,然而目前大多數(shù)的電線電纜質(zhì)量仍然不夠合格,很容易出現(xiàn)安全問題,在今后的發(fā)展中,一定要根據(jù)國家規(guī)定的標準,嚴格檢測相關(guān)產(chǎn)品。本文從電線電纜檢測技術(shù)的作用出發(fā),分析發(fā)生電線電纜故障的主要原因,并闡述相關(guān)檢測技術(shù)和檢測方法。

關(guān)鍵詞:電線電纜;檢測技術(shù);檢測方法

在電力系統(tǒng)中,各種電力、電氣、電能的輸送都需要電線電纜,社會生產(chǎn)和人們的日常生活也離不開電力產(chǎn)品。但是由于電線電纜領(lǐng)域?qū)ιa(chǎn)技術(shù)方面沒有過高的要求,因此各種產(chǎn)品質(zhì)量問題層出不窮,給國家的發(fā)展和人們的生活帶來了嚴重影響,因此必須要高度重視電線電纜的檢測技術(shù)和檢測方法。

電線和電纜的檢測材料主要包括固體,液體和氣體,其中固體材料的使用最為廣泛。由于部分制造商生產(chǎn)不合格的電線電纜產(chǎn)品,降低了市場環(huán)境下電線電纜產(chǎn)品的整體質(zhì)量,從而導(dǎo)致安全事故頻頻發(fā)生。為了改變現(xiàn)狀,國家一定要及時規(guī)定生產(chǎn)標準,提高對電線電纜檢測環(huán)節(jié)的認知,以及完善和創(chuàng)新電線電纜測試技術(shù),制造商必須嚴格按照標準生產(chǎn)相關(guān)的電線電纜產(chǎn)品并進行檢測,避免由于電線電纜產(chǎn)品的不合格而引起的損失,從而提高電線電纜產(chǎn)品的質(zhì)量水平。

二、電線電纜故障的主要原因

(一)、導(dǎo)體電阻不達標

導(dǎo)體電阻(20℃)是評估電線電纜產(chǎn)品的導(dǎo)體材料和導(dǎo)體截面積的主要指標,如果導(dǎo)體材料的質(zhì)量不過關(guān)、導(dǎo)體截面積太小、生產(chǎn)工藝不合理等原因,導(dǎo)致導(dǎo)體電阻沒有達到標準,會提高電線電纜的熱度,破壞絕緣層塑料并造成短路,嚴重降低電線電纜的性能和使用時長,甚至引起火災(zāi)。

(二)、結(jié)構(gòu)尺寸不合格

電線電纜的結(jié)構(gòu)尺寸包括絕緣厚度、絕緣偏心度和護套厚度,不合格的原因主要有以下方面:第一,為了不影響城市的交通設(shè)施和生活環(huán)境,電線電纜通常會埋在地下,但是部分制造商為了降低成本,埋的并不深,很容易受到車輛的壓力而導(dǎo)致電線電纜斷裂;第二,在生產(chǎn)過程中,溫度過高,沒有達到合格標準,引起螺桿轉(zhuǎn)速和牽引速度出現(xiàn)異常;第三,模具和模具之間的距離沒有得到合理配置;第四,冷卻工藝中的冷卻槽太短,引起絕緣偏心度不達標;第五,制造商沒有嚴格按照規(guī)定進行檢測。

(三)、絕緣性能

電線電纜材料隨著使用年份的增加,其絕緣、護套老化前后的抗壓力和斷裂伸長率等性能都會在熱量的影響下會日漸發(fā)生變化[1]。絕緣結(jié)構(gòu)是整個電線電纜儀器的重要組成部分,對電力設(shè)備的使用年限起關(guān)鍵作用。絕緣性能通常指電線電纜外部材料的性能,會對電線電纜的使用產(chǎn)生一定的影響,如果絕緣厚度沒有達到標準,極易引起漏電和斷電現(xiàn)象。

三、電線電纜檢測技術(shù)和檢測方法

(一)、在線檢測

為了提高電線電纜的檢測效率,一定要成立和實施一套與時俱進的專家檢測系統(tǒng)。在線檢測技術(shù)是目前根據(jù)創(chuàng)新和研發(fā)形成的處理故障的主要途徑,利用多種儀器設(shè)備遠程監(jiān)控電線電纜的基礎(chǔ)運行情況,并根據(jù)相關(guān)標準對相關(guān)信息進行完善和創(chuàng)新。

(二)、離線檢測

離線檢測技術(shù)主要指根據(jù)介電損耗原理,合理控制損耗角的正切值,受到外部因素的影響,電纜會比較分散,從而加大測量結(jié)果的誤差。在局部連續(xù)測試期間,檢測結(jié)果會隨著電磁性能的變化而變化。而在采用直流耐壓測試期間,會使電力儀器存在于放松狀態(tài),以便合理管控電流變化,但是該技術(shù)不適用于高壓像素電纜。

(三)、工頻耐壓檢測

該技術(shù)主要是為了檢測穩(wěn)定狀態(tài)下的額定峰值電壓,需要高性能的檢測裝置才能檢測每個結(jié)構(gòu)的絕緣強度,并根據(jù)檢測結(jié)果,評估電線電纜產(chǎn)品的過電壓水平。此外,在工頻耐壓檢測過程中,測試頻率必須保證在四十九到六十一赫茲范圍內(nèi),絕緣厚度要大于0.6mm,如果加壓五分鐘后沒有出現(xiàn)擊穿現(xiàn)象,就說明電線電纜達到了測試指標。

(四)、絕緣厚度、結(jié)構(gòu)尺寸檢測

在檢測絕緣厚度時應(yīng)取出所有導(dǎo)體和隔離層,用刀片在導(dǎo)體軸線垂直的平面垂直切片,抽取三組18個數(shù)值的平均值確定檢測結(jié)果,如果平均值大于標準值說明達標,小于標準值則不達標。最小值即為絕緣厚度的最小厚度,應(yīng)大于標準值的90%一0.1米。在檢測過程中要注意以下方面:第一,從目測的最薄點展開檢測;第二,絕緣試件的壓印標記凹痕厚度不計入平均數(shù)值,然而壓印標記凹痕處的絕緣厚度必須在電線電纜產(chǎn)品的指標內(nèi)。電線電纜的結(jié)構(gòu)尺寸檢測主要包括產(chǎn)品名稱、型號、外觀和大小等方面,檢查其是否達到國家的相關(guān)要求和標準[2]。結(jié)構(gòu)尺寸應(yīng)該通過投影儀和繞包帶進行檢測,橢圓度可以在圓形護套電纜同一平面上任意兩點外徑的差值進行檢測,差值不能超過標準值的15%。要注意的是在檢測過程中要盡量減少擠壓,以保證檢測結(jié)果的精準。

(五)、絕緣老化前后拉力檢測

絕緣老化前后拉力檢測必須要嚴格執(zhí)行g(shù)b,t2951.11-2008的指標進行檢測,調(diào)整樣品的檢測溫度和檢測時間,然后,針對樣品的類型使用合理的檢測技術(shù)對電線電纜的截面積進行檢測,整理出拉伸斷裂時電線電纜的伸長距離和最大抗拉應(yīng)力,并根據(jù)檢測數(shù)值算出電線電纜在斷裂前的拉伸強度和斷裂伸長率,與標準值相比決定其是否達標。

(六)、電纜故障定位檢測

相關(guān)檢測人員必須要深入掌握電纜運行的實時情況,及時發(fā)現(xiàn)電線電纜的故障距離和基本路徑,并確定電線電纜故障點的大致位置,才能提高電線電纜故障檢測效率,進而對電線電纜展開更好的維護和管理[3]。常用的故障定位檢測方法主要有兩種:
第一,音頻感應(yīng)法。音頻感應(yīng)法是根據(jù)人聽到的聲音判斷故障區(qū)域的準確位置。第二,聲磁同步法。聲磁同步法是在現(xiàn)有的故障區(qū)域處,通過聲波和電磁波找出相應(yīng)的故障位置。首先將高壓脈沖信號添加到現(xiàn)有的故障電纜中,當該區(qū)域產(chǎn)生放電和聲音信號時,會引起強脈沖磁場信號,根據(jù)兩種信號不同的傳播速度找到傳播時間差的最小值,確定故障的具體位置。

四、結(jié)語

隨著電線電纜檢測技術(shù)的不斷發(fā)展,相關(guān)檢測人員必須要深入認識和發(fā)揮檢測技術(shù)的積極作用,并展開大規(guī)模的推廣,及時發(fā)現(xiàn)和處理電線電纜的故障,嚴格執(zhí)行電線電纜檢測技術(shù)的相關(guān)指標,為社會和人們提供高質(zhì)量的電線電纜產(chǎn)品。

參考文獻:

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檢測員技術(shù)工作總結(jié)篇七

1.前言

聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,pcr)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴增技術(shù)。它具有特異、敏感、產(chǎn)率高、快速、簡便、重復(fù)性好、易自動化等突出優(yōu)點;能在一個試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一dna片段于數(shù)小時內(nèi)擴增至十萬乃至百萬倍,是肉眼能直接觀察和判斷;可從一根頭發(fā)、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的dna供分析研究和檢測鑒定。過去幾天幾個星期才能做到的事情,用pcr幾個小時便可完成。pcr技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項革命性創(chuàng)舉和里程碑。

該酶促反應(yīng)最基本的3個環(huán)節(jié)是:[1]模板dna的變性,即在94℃下模板雙鏈dna變?yōu)閱捂渄na;[2]引物與模板鏈的特異性復(fù)性;[3]引物鏈的延伸。

2.研究的目的與意義

聚合酶鏈反應(yīng)(pcr)技術(shù)建立以來,定性技術(shù)不斷改進和完善,可以達到檢測單個靶序列的水平、但實際工作中常需要定量檢測標本中核酸,而不是某一特定序列存在與否,借助pcr對基因快速、敏感、特異而準確定量成為目前分子生物學(xué)技術(shù)研究的熱點之一。定量pcr旨在評估樣品中靶分子數(shù),此測定可以是絕對的,如每微克樣本中靶dna的分子數(shù);也可以是相對定量,即與設(shè)定的內(nèi)參照或外參照比較而言。鑒于pcr方法主要有5個,即對pcr產(chǎn)物的直接定量、極限稀釋法、靶基因與參照基因的同步擴增、競爭性pcr和熒光定量pcr[1]。這幾種放啊各有利弊,對其選擇取決于靶基因的特性、對pcr產(chǎn)量的期望值、對準確度的要求、需要相對還是絕對定量。

人類對于核酸的研究已經(jīng)有100多年的歷史。20世紀60年代末70年代初,人們致力于研究基因的體外分離技術(shù)。但是,由于核酸的含量較少,一定程度上限制了dna的體外操作。khorana于1971年最早提出核酸體外擴增的設(shè)想。但是,當時的基因序列分析方法尚未成熟,對熱具有較強穩(wěn)定性的dna聚合酶還未發(fā)現(xiàn),寡核苷酸引物的合成仍處在手工、半自動合成階段,這種想法似乎沒有任何實際意義。

1985年,美國科學(xué)家kary mullis在高速公路的啟發(fā)下,經(jīng)過兩年的努力,發(fā)明了pcr技術(shù),并在science雜志上發(fā)表了關(guān)于pcr技術(shù)的第一篇學(xué)術(shù)論文。從此,pcr技術(shù)得到了生命科學(xué)界的普遍認同,kary mullis也因此而獲得1993年的諾貝爾化學(xué)獎。

3.1.基礎(chǔ)研究方面的應(yīng)用

[1] 擴增目的基因和鑒定重組子; [2]克隆基因;

在臨床上的應(yīng)用[2]

[1]在遺傳學(xué)上的應(yīng)用:人類的遺傳性疾病是因為某一堿基序列發(fā)生了突變,使之缺失或形成某一限制性內(nèi)切酶的識別位點,通過pcr結(jié)合限制片段長度多態(tài)性分析(pcr-rflp),就可以從基因的水平對遺傳性疾病進行分析。例如,血友病甲是一種常見的遺傳性出血性疾病,患者體內(nèi)缺乏凝血因子fviii這是由于基因第14個外顯子的第336位氨基酸的編碼基因發(fā)生了突變,產(chǎn)生了一個新的psti酶切點,因此可以使用pcr-rflp對血友病進行診斷。pcr還可以用來檢測遺傳性耳聾和leber遺傳性視神經(jīng)病。

dna的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈dna在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在dna聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。實驗中發(fā)現(xiàn),dna在高溫下也能發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制dna的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入dna聚合酶、dntp就可以完成特定基因的體外復(fù)制。

標準的pcr過程分為三步:

變性(90℃-96℃):雙鏈dna模板在熱作用下,氫鍵斷裂,形成單鏈dna 2.退火(25℃-65℃):系統(tǒng)溫度降低,引物與dna模板結(jié)合,形成局部雙鏈。

① 早期診斷,因為pcr擴增極其敏感,理論上可檢出100cid/ml乙肝病毒的患者血清,在感染潛伏期即可被pcr法檢出。

② 對低持續(xù)感染乙肝病人的診斷,有些乙肝病人體內(nèi)的病毒長期低復(fù)制感染,血清病毒濃度極低,一般酶標試劑無法檢出,可以用pcr法檢出。

pcr技術(shù)

引物: pcr產(chǎn)物的特異性主要取決于引物鏈的特異性。由于存在同源序列,隨意設(shè)計的引物鏈,其pcr產(chǎn)物在電泳分析時可能出現(xiàn)多條鏈,因此在設(shè)計引物鏈時應(yīng)充分考慮引物特異性。引物長度一般為15-30個堿基,g+c含量為40-60%,濃度0.1-1umol/l。taqdna聚合酶:濃度為1-4ul/100ul。taqdna聚合酶單位用量增長可能導(dǎo)致非特異dna擴增。模板dna:應(yīng)避免混有任何蛋白酶、核酸酶、dna聚合酶抑制劑及能結(jié)合dna的蛋白酶。dna摸板的制備方法有加熱法、凍溶法、超聲波粉碎法、堿變性法、sds裂解法等多種。

4×dntps : dntp儲存液ph應(yīng)為7.0,在反應(yīng)體系中,4種dntp的濃度應(yīng)相同,每種dntp的濃度以50-200 umol/l為宜。緩沖液及其他成份:pcr反應(yīng)體系中,一般采用tris-hcl緩沖液。適宜的mg2+濃度為高于dntp總濃度0.2-2.5 mmol/l。

6.研究內(nèi)容

pcr反應(yīng)混合物經(jīng)過循環(huán)擴增后,所需做的工作就是檢測反應(yīng)液中是否存在預(yù)期擴增產(chǎn)物及產(chǎn)物的特異性。目前已經(jīng)發(fā)展了許多檢測分析pcr擴增產(chǎn)物的方法。包括凝膠電泳、高壓液相色譜、核酸探針雜交、探針捕獲酶免疫分析、酶切圖譜分析、單鏈構(gòu)型多態(tài)性分析、核酸序列分析。

pcr技術(shù)類型[5]

復(fù)合pcr技術(shù)

彩色pcr技術(shù)

抗原捕獲pcr技術(shù) 增敏pcr技術(shù)

酶標pcr技術(shù)

二溫式pcr技術(shù)

錨定pcr技術(shù)

定量pcr技術(shù)

多重pcr技術(shù)

其pcr產(chǎn)物由凝膠電泳測定,檢測時間為ld。

徐建國等根據(jù)o157: h7 特有的hlya、b基因序列設(shè)計了pcr引物,產(chǎn)物為338bp。

pcr技術(shù)在大腸桿菌o157: h7檢測中(2)多重pcr:由于鑒定o157: h7血清型不能僅僅依靠簡單pcr,近年來國外學(xué)者對多重pcr方法在大腸桿菌o157: h7的診斷價值方面進行了研究。meng等同時擴增了eae 上游基因片段、sitⅰ基因片段、sit ⅱ基因片段,其長度分別為633、210、484bp。此引物設(shè)計可有效區(qū)別o157: h7血清型與o55: h7、o55: nm。fratamico等在一個單一反應(yīng)中同時擴增了eae基因、slt ⅰ、ⅱ的保守序列及60mda質(zhì)粒保守序列,其產(chǎn)物分別為1087、227、224、166bp。嚴笠選用針對大腸桿菌o157: h7志賀樣毒素ⅰ、ⅱ(slt-ⅰ、slt-ⅱ)和溶血素(hly)基因的三對引物,在同一擴增體系中進行pcr,檢測12株不同來源的o157: h7大腸桿菌及其它致病性大腸桿菌及沙門菌、志賀菌15株。結(jié)果復(fù)合pcr方法較單一pcr方法具有較高的特異性,12株o157: h7取得了穩(wěn)定、可靠的陽性結(jié)果。能迅速、有效地與其它致病性大腸桿菌及沙門氏菌、志賀菌相鑒別。

pcr技術(shù)在大腸桿菌o157: h7檢測中的應(yīng)用(3)原位pcr: kurokawa等不用培養(yǎng)過程,直接用原位pcr技術(shù)結(jié)合落射顯微鏡,在單細胞水平快速檢測o157: h7。

4.23srrna在大腸桿菌o157: h7分型、檢測中

傳統(tǒng)的細菌分類方法主要依賴于細菌的形態(tài)學(xué)、代謝產(chǎn)物、酶活性和表面抗原等特征。隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)理論和技術(shù)的迅速發(fā)展,微生物檢測進入了基因時代,以核糖體核糖核酸序列為基礎(chǔ)的分類方法為微生物的鑒別提供了新的分子生物學(xué)方法。[6]如16srrna、23srrna、16-23srrna區(qū)間序列分析等等,它完全不同于傳統(tǒng)方法,具有快速、簡便、敏感和特異等優(yōu)點。

參考文獻

檢測員技術(shù)工作總結(jié)篇八

經(jīng)過一年的實踐鍛煉和理論學(xué)習(xí),我掌握和運用了一些最基本的試驗檢測基礎(chǔ)知識和標準規(guī)范,尤其是對建筑原材料這個檢測模塊,有些個人心得談?wù)劇F鋵嵲囼炇业墓ぷ骶褪且怨こ藤|(zhì)量控制為核心基礎(chǔ),其性質(zhì)決定了試驗檢測機構(gòu)是一個必須科學(xué)嚴謹工作的部門,是一切質(zhì)量控制的基礎(chǔ),一切堅持實事求是,在確保試驗檢測數(shù)據(jù)的準確性、真實性的基礎(chǔ)上出具相關(guān)的質(zhì)量證明文件。試驗檢測工作對人員個體要求較高,一方面要具備動手操作的能力,另一方面要具備理論和計算能力,我認為更重要的是要具備認真細心、科學(xué)嚴謹、務(wù)實求真、有據(jù)可循的工作態(tài)度和相關(guān)的業(yè)務(wù)技術(shù)水平。雖然說起來有很多人都知道這個道理,但是真真要落實到位,按部就班這些事實還是有一定難度的。

以上內(nèi)容是我對試驗檢測工作的基本認識和定位,我的具體工作也是圍繞以上思想進行圈定的,同時積極配合主任交代的各項階段性工作安排,為工程實體原材料質(zhì)量提供具體的數(shù)據(jù)依托。

現(xiàn)結(jié)合日常工作總結(jié)如下:

為這些看似枯燥而又乏味的標準就是試驗檢測人員的準繩和生命力,標準規(guī)范是試驗檢測員說話的依據(jù),也是檢測工作應(yīng)該努力的方向,更是檢測工作強有力的事實根據(jù)。學(xué)習(xí)的目的就是能夠付諸于實踐,更主要的是靈活而具有針對性的發(fā)揮其規(guī)范的性能。隨著時間的推移,對標準規(guī)范和試驗檢測流程也是越來越熟悉了,既而工作效率就會事倍功半。通過不斷的學(xué)習(xí)和實踐運用,基本做到了用標準規(guī)范自己的試驗檢測行為。

2.對吐庫二線的試驗檢測項目而言,我已經(jīng)掌握且能夠嫻熟運用以下項目的標準規(guī)范及實操要領(lǐng),(粗細骨料、鋼筋水泥、路基填料、混凝土試件抗壓);了解并熟悉了以下原材料(外加劑、土工布、防水卷材、波紋管、鋼絞線、水質(zhì)分析、骨料堿活性等)的試驗標準規(guī)范。

3.在熟練運用上述規(guī)范的同時,如果有時間和機會,我會學(xué)習(xí)和拓展更多的檢測業(yè)務(wù)知識。

1.在這過去的一年當中,對工程的'參建單位所委托的檢測任務(wù)是及時有序完成的,尤其是對常規(guī)的原材料檢測基本上做到了及時、優(yōu)質(zhì),有部分特殊原材料由于在蘭州或西安試驗室檢測,有少數(shù)報告的出具會有些滯后和錯誤,但總體情況還是可以的。

2.今年具體開展的工作有:混凝土結(jié)構(gòu)物原材料檢驗(其中包括見證檢驗;平行檢驗及抽檢部分)、路基、橋涵缺口回填檢測、配合建設(shè)指揮部做些階段性檢查和抽查工作、按時統(tǒng)計季度試驗檢測費用、定期完善歸檔內(nèi)業(yè)資料、每月底參加指揮長聯(lián)系會議,對于這些工作的完成情況基本圓滿和到位。

1.經(jīng)過長時間的實踐和鍛煉,我對實操和技能的理解很簡單,就是對試驗檢測儀器、操作流程的嫻熟程度,以及多次動手操作總結(jié)出來的經(jīng)驗,更重要的是對不懂或不熟悉的試驗項目取得了自我突破。

2.在吐庫線我所使用過的儀器設(shè)備,操作要領(lǐng)基本上是嫻熟流暢的,能夠快速有效的完成工作任務(wù),練就了細節(jié)操作對檢測結(jié)果的影響力。

1.雖然有好多經(jīng)驗是值得繼續(xù)保持和發(fā)揚的,但同時也犯了不少錯誤,錯誤主要體現(xiàn)在對工作的重視程度不夠,關(guān)鍵的是對有些試驗流程存在僥幸心理,制造了不少麻煩和不必要的錯誤,從中也總結(jié)了不少經(jīng)驗教訓(xùn),勤動手、多動腦、重細節(jié)、愛思考,養(yǎng)成這些習(xí)慣就可以大大的減少或消除錯誤和不足。

2.今年由于對特殊原材料在兩地試驗室檢測,我認為在其工作流程和部分環(huán)節(jié)中出現(xiàn)了漏洞,譬如各試驗站之間的溝通較少,遇事總是先摘清自己的問題,使各個檢測站互推責(zé)任,致使個別檢測樣品丟失或數(shù)據(jù)混亂。

1.常說熟能生巧,不管是標準規(guī)范還是操作流程,只要做到心中有數(shù)、有自信、有捷徑,已經(jīng)形成了經(jīng)驗的積累和價值,熟練是前提,對于檢測工作勤思考和多動手是必須的。經(jīng)過長時間的磨練我才知道,自如的社交能力才是工作有起色、有突破、有挑戰(zhàn)、有空間的法寶。

2.對于檢測和社交的空白區(qū),自己是最清楚的,檢測的部分盲區(qū)需要用勤奮代替懶惰填補這塊不足,社交中表現(xiàn)出來的捉襟見肘需要用自信豁達去潤色。

1.在新的一年中,我想換一個新的工作環(huán)境,因為新的一年會有更多的責(zé)任需要去承擔(dān),同時我也想更好的保持昔日有些良好的工作習(xí)慣和模式。

2.回顧一年的時光積淀,更多看到的是自己工作中的不足和瑕疵,這些應(yīng)該是來年去改進和完善的,有些錯誤和不足可能需要時間去改正和加強。

檢測員技術(shù)工作總結(jié)篇九

多年來我始終恪守一個信念:要想熟練掌握試驗檢測工作技能,必須重視理論知識的學(xué)習(xí)。首先要從學(xué)習(xí)試驗規(guī)程入手,掌握工作要領(lǐng)和工作程序,搞清試驗原理,才能更好地開展試驗檢測工作,書是我們試驗檢測工作的行動指南。其次,要從學(xué)習(xí)施工技術(shù)規(guī)范和質(zhì)量標準做起,弄清試驗檢測內(nèi)容、質(zhì)量控制及評判標準,這是我們對試驗結(jié)果的判定依據(jù)。

只有堅持理論和實際相結(jié)合的道路,將學(xué)習(xí)到的知識應(yīng)用于試驗檢測實際工作中,才能更好地指導(dǎo)我們的工作,豐富知識面,只有通過長期的努力和實踐的錘煉,才能使學(xué)到的理論知識得到鞏固、消化和吸收,業(yè)務(wù)技術(shù)水平得到不斷豐富和提高,進一步糾正工作中存在的錯誤認識和做法,自己得到更快成長,多年的工作經(jīng)歷證明了這點。

1.部分施工單位在上路床及墊層砂礫材料的試驗檢測工作中不做承載比強度試驗,認為天然砂礫的強度較普通的填料高很多,沒必要做承載比試驗。其實這是一種錯誤認識和做法,因為天然砂礫除含有承載能力高的大粒徑砂礫粒料,還含有部分承載能力較低的細粒土,其整體承載能力是由以上兩個因素及其級配組成決定的,是否滿足施工技術(shù)規(guī)范及設(shè)計要求是未知數(shù),最終需要通過承載比強度試驗來確定。

2.個別施工單位甚至建設(shè)項目在路面水泥穩(wěn)定類基層施工和試驗檢測工作中,存在不做水泥穩(wěn)定材料混合料的延遲時間試驗,只是以水泥的凝聚時間作為混合料最終碾壓時間進行施工控制。這種做法也是不正確的,因為水泥凝聚時間的長短只是影響混合料延遲時間的一個重要因素,材料的種類和品質(zhì)也是一個重要因素。隨著延遲時間的變長,混合料的密實度和強度損失也變大。大量的模擬試驗和施工實踐都證明了這一點,所以進行延遲時間試驗,選擇確定合理的延遲時間就顯得尤為重要。當然選擇凝聚時間較長的水泥和良好品質(zhì)的材料也是非常重要的。凡此種種,不再敘述。每當發(fā)現(xiàn)上述情況,都或提出建議或予以糾正。

1.比如我們在混凝土混合料拌制中采用了“二次投料法”的攪拌工藝,即造殼技術(shù),通過調(diào)整投料順序的方法,使混凝土拌合料的施工和易性及力學(xué)性能得到顯著改善。施工實踐證明:混凝土拌和料的坍落度增加5%左右,早期強度提高8%~12%,28天抗壓強度提高15%~25%.澆筑的混凝土結(jié)構(gòu)物外表光潔度高、密實性好。

2.比如我們在水下大直徑樁基礎(chǔ)及承臺的混凝土澆筑中使用了外摻粉煤灰的混凝土,施工實踐表明:不僅混凝土拌和料和易性有顯著改善,而且所澆筑的混凝土結(jié)構(gòu)物表面光潔、無收縮開裂現(xiàn)象且后期強度高。

1.公路試驗檢測工作是一項繁瑣而嚴謹且科學(xué)性極強的'工作,是工程質(zhì)量指導(dǎo)、檢驗、控制的重要手段,是工程質(zhì)量評定的重要依據(jù),是工程質(zhì)量的重要保證。因此既要確保試驗檢測數(shù)據(jù)的及時性、準確性、可靠性和嚴肅性,同時又要培養(yǎng)一支高素質(zhì)的試驗檢測隊伍,這是當前擺在公路工程建設(shè)工作面前的迫切任務(wù)。

2.公路試驗檢測工作要求每位試驗檢測人員不僅具有基本的理論和專業(yè)知識,較高的操作技能,而且要具有科學(xué)、嚴謹、認真、負責(zé)的工作態(tài)度,不得有半點馬虎和懈怠,特別是試驗負責(zé)人要具備較豐富的專業(yè)知識、較高的理論技術(shù)水平、較強的分析判斷和解決實際問題的能力。為此,我們每一個試驗人員要不斷加強業(yè)務(wù)學(xué)習(xí),努力提高自身素質(zhì),切實提高試驗檢測水平和工作質(zhì)量,為公路工程建設(shè)提供真實有效、準確可靠的試驗檢測數(shù)據(jù),促進工程質(zhì)量不斷提高。

回顧自己多年來走過的歷程,既有過成功的經(jīng)驗,也有過失敗的教訓(xùn)。我深刻地認識到知識無止境、學(xué)習(xí)無止境、技術(shù)無止境,自身的業(yè)務(wù)素質(zhì)和技術(shù)水平需進一步提高,為此我要加強學(xué)習(xí)、努力工作、認真總結(jié)、不斷提升,為我國的公路建設(shè)事業(yè)做出新貢獻。

檢測員技術(shù)工作總結(jié)篇十

20xx年7月,我從xxx畢業(yè),并于同年參加工作。20xx年7月,被公司聘為助理工程師,20xx年1月,通過xx工程師職稱。任現(xiàn)職以來,我主要從事公路工程試驗檢測、技術(shù)服務(wù)、科技研發(fā)及與之相關(guān)的專業(yè)技術(shù)工作。幾年來,我立足本職,愛崗敬業(yè),勤奮工作,具有較強的敬業(yè)精神和奉獻精神,工作中吃苦耐勞,積極主動,作風(fēng)踏實,勤于思考,工作思路清晰,能把實際工作同理論研究相結(jié)合,積極為本單位的長遠發(fā)展貢獻自己的智慧和力量。

1、做好試驗室日常管理工作,確保設(shè)備運行正常、檢測報告數(shù)據(jù)準確。

在公司我負責(zé)交通工程、集料、瀝青混合料、土工合成材料等全部14個功能試驗室,在設(shè)備維護保養(yǎng)和日常試驗檢測中形成了一套較為完善的管理模式。各試驗室共有試驗檢測設(shè)備200余臺套,針對部分使用頻率較高、易損的設(shè)備我制定了較為詳細的維護計劃,做到專人操作、專人定時保養(yǎng),幾年來試驗室設(shè)備運行良好,檢定校準合格,保證了各類檢測數(shù)據(jù)的客觀準確;在日常試驗檢測中,我?guī)ьI(lǐng)科室人員按照公司程序文件要求,嚴格把關(guān)試驗檢測各個環(huán)節(jié),培養(yǎng)了一大批優(yōu)秀的試驗檢測人員。5年來,我公司在交通部、省交通運輸廳組織的各類工程材料比對試驗中結(jié)果均為滿意,為我公司的健康發(fā)展打下了良好的基礎(chǔ)。

2、創(chuàng)新技術(shù)服務(wù)方式、提高技術(shù)服務(wù)水平,為工程質(zhì)量保駕護航。

近年來,我先后負責(zé)帶領(lǐng)同事們完成xx高速公路、xx高速公路、xx,從原材料檢測、配合比設(shè)計、試驗段鋪筑到正常階段全程跟蹤服務(wù)。技術(shù)服務(wù)過程中,我們充分發(fā)揮集體智慧,積極創(chuàng)新,嚴謹求實,在規(guī)范要求的馬歇爾設(shè)計方法基礎(chǔ)上采用了貝雷法、高性能瀝青路面(superpave)法等進行驗證,并用多種材料和多種配比比例進行性能驗證,在瀝青混合料高、低溫性能方面積累了大量數(shù)據(jù),在應(yīng)對現(xiàn)場料源變化、施工過程影響因素多等問題的解決中得到了較好的應(yīng)用,給委托單位解決了大量技術(shù)和施工難題,為工程的順利進行打下了良好的基礎(chǔ),技術(shù)服務(wù)水平得到了委托單位和項目業(yè)主的充分認可和好評。

近年來,作為負責(zé)人或主要人員先后參與并實施了了公司多個科研課題的試驗檢測及專業(yè)技術(shù)服務(wù)工作。

以上3個課題均為新型材料在我省的首次實際應(yīng)用,通過后期的監(jiān)控檢測證明,課題項目均達到了預(yù)期的目的`。

從參加工作以來,努力學(xué)習(xí)本專業(yè)的理論知識和專業(yè)技能,重視不斷提高自己的業(yè)務(wù)水平和能力。通過多年的努力,我的專業(yè)技術(shù)和業(yè)務(wù)工作能力得到了較大的提高,為更好的完成各項工作任務(wù)奠定了堅實的基礎(chǔ),也得到了領(lǐng)導(dǎo)的認可。自20xx至20xx年度連續(xù)五次被公司評為年度“優(yōu)秀員工”,在各類專業(yè)期刊上發(fā)表《xx》、《xx》、《xx》、《xx》等多篇學(xué)術(shù)論文。

為了更好地適應(yīng)當前的工作,在努力做好本職工作的同時,我積極學(xué)習(xí),參加各類繼續(xù)教育,以提高自己的業(yè)務(wù)水平。在取得xx,20xx年12月,參加交通運輸部組織的監(jiān)理工程師安全環(huán)保教育培訓(xùn)并考試合格,20xx年2月參加山東省公路工程試驗檢測人員繼續(xù)教育培訓(xùn)考試合格。

在今后的工作中,我一定會更加積極學(xué)習(xí),不斷改進工作方法,提高工作效率,踏踏實實,任勞任怨,勤奮工作,努力成為一名優(yōu)秀的工程技術(shù)專業(yè)人員。

本人承諾:所提供的個人信息和證明材料真實準確,對因提供有關(guān)信息、證件不實或違反有關(guān)規(guī)定造成的后果,責(zé)任自負。

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